胚胎冷凍保存方法有哪些？了解下

  胚胎冷凍保存是將胚胎保存在—196~C超低溫的液氮中做長期保存。可使胚胎移植不受時間地點的限制，從而達到提高胚胎移植效率，長期保存優(yōu)良基因的目的。今天，我們就來介紹下現(xiàn)有的胚胎冷凍方法。

  現(xiàn)有的胚胎冷凍方法有三種：

  ①常規(guī)冷凍法：也叫慢速冷凍法、逐步降溫法。將采集到的胚胎用培養(yǎng)液洗滌后置入有不同冷凍保護劑(甘油或二甲亞楓(DMSO)等)濃度的三種冷凍液中(冷凍液濃度由低到高，終濃度1.4M)，每種冷凍液中平衡5分鐘，然后將胚胎和冷凍液裝入細管中封口、標記，放入冷凍儀中進行冷凍。冷凍速率先以1～3~C/分下降至-6～-7℃，在此溫度誘發(fā)結晶，平衡10分鐘，然后，以0.3℃/分的速率降溫至-35～_38℃，之后投入液氮中保存。胚胎解凍后，需按胚胎進入冷凍液時的相反濃度，即從高到低濃度脫除冷凍保護劑，每步5分鐘，后置入含20%血清的PBS保護液中洗滌3次，徹底脫除冷凍保護劑?；蛘邔⒔鈨龊蟮呐咛シ湃?.5M(或1.0M)的蔗糖溶液中平衡10分鐘，再用上述PBS液洗滌3次。

  ②一步冷凍法：也叫一步細管法。該方法是由慢速冷凍法改進而來，細管內(nèi)的冷凍液和蔗糖液是分開的，因此，在細管內(nèi)用蔗糖液可一步脫除甘油抗凍劑，從而利于在生產(chǎn)中推廣應用。

  ③玻璃化冷凍法：是近年來發(fā)展起來的一種新的方法。將胚胎在適當?shù)睦鋬霰Ｗo劑混合液中作短暫處理后，直接投入液氮。冷凍保護劑在急劇降溫到很低溫度時能被濃縮而不結晶，而且液體的粘性增強，由液態(tài)變?yōu)橥该鞯墓虘B(tài)，形成玻璃化。用這種方法冷凍，無需凍前分步添加抗凍劑和凍后分步脫除抗凍劑的繁瑣步驟，簡化了冷凍過程，是一種簡便、快速、的冷凍方法，不需要冷凍儀器。

  以上就是專家的詳細介紹，相信大家在此基礎之上都有一定的了解，希望對大家有所幫助。如果您還想了解更多相關的資訊，如果您還有不懂或任何疑問，可以與專家在線咨詢，為您答疑解惑。